Alors que Bowser (Jack Black) et ses sbires s’approchent rapidement du Royaume Champignon, Mario et Peach réussissent s’unir aux Kongs pour le plus grand bien. Afin de rattraper Bowser et sa flotte, Cranky Kong (Fred Armisen) élabore un plan pour intercepter son armée via une bataille de style « Mad Max: Fury Road » sur Rainbow Road. Tout d’abord, il y a une brève séquence dans laquelle nos héros créent leurs karts avec exactement les mêmes curseurs et boutons de personnalisation introduits pour la première fois dans « Mario kart 7″, puis c’est parti pour les courses. Comme un remix des explosions du thème « Mario Kart » de Koji Kondo, la route transparente et colorée se manifeste.

Depuis « Super Mario Kart » de 1992 pour la Super Nintendo, une nouvelle version de la piste a été présentée dans chaque entrée de la série en tant que grande finale. La Rainbow Road représentée dans « The Super Mario Bros. Movie » n’est pas une recréation exacte 1: 1 d’une version particulière de celle-ci trouvée dans les jeux, mais elle est fidèle à bon nombre des mêmes esthétiques et règles. La route au néon est entièrement composée d’un faisceau de lumière qui tourne autour du ciel nocturne avec peu ou pas de garde-corps, ce qui en fait l’une des pistes les plus difficiles à manœuvrer dans n’importe quel jeu Mario Kart.

Cependant, les joueurs plus expérimentés savent exactement comment tirer pleinement parti de la conception sans rail. Dans la plupart des versions de Rainbow Road, il est possible de sauter des portions entières de la piste avec suffisamment de planification et une augmentation de vitesse au bon moment. L’un des exemples les plus célèbres de ceci est celui de « Mario Kart 64 » (vu ci-dessus), mais la communauté des speedrunners a trouvé beaucoup plus d’exploits à travers des titres comme « Mario Kart Wii » et « Mario Kart 8 Deluxe. »